[求救]IP抓不到target protien

看板Biotech作者 (買沉木)時間17年前 (2008/07/25 22:28), 編輯推噓3(3推 0噓 12→)
留言15則, 4人參與, 最新討論串1/4 (看更多)
小弟這幾天做IP 用monoclonal anti-mouse的1抗 polyclonal anti-goat的2抗 結果western出來結果很多雜band 想請問有沒有前輩有類似經驗的可以解決@@ 按理來說 不同的Fc應該不會有問題才對 是因為polyclonal造成的嗎? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 118.170.139.5
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07/25 23:46, , 1F
你的anti-動物 應該都打反了吧? 通常會擔心是一抗的問題
07/25 23:46, 1F
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07/25 23:47, , 2F
antubody來源?同樣實驗有別人作過?
07/25 23:47, 2F
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07/26 07:08, , 3F
抱歉 不是很懂打反的意思QQ 抗體都是跟廠商買的
07/26 07:08, 3F
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07/26 07:09, , 4F
1家是dako 1家是R&D 實驗有沒有其他人做過我可能要去查
07/26 07:09, 4F
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07/26 07:18, , 5F
謝謝大家的幫忙 我會再去試試看^^
07/26 07:18, 5F
推
07/26 08:00, , 6F
買來的抗體效果好壞差很多 跟他宣稱的是不是monoclonal
07/26 08:00, 6F
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07/26 08:01, , 7F
沒關係 有時候要重買好幾家才買得到好的antibody
07/26 08:01, 7F
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07/26 08:02, , 8F
你有作其它WB的經驗嗎 有而且沒問題的話 可能antibody的
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07/26 08:02, , 9F
問題
07/26 08:02, 9F
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07/26 08:03, , 10F
恩 我再去看有沒有paper有人引用 謝謝S大
07/26 08:03, 10F
推
07/26 21:39, , 11F
IP的抗體最好用polycolonal,因為可以確保你能抓到你要的
07/26 21:39, 11F
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07/26 21:39, , 12F
western時再換用monoclonal 以增加specificity...
07/26 21:39, 12F
推
07/26 22:29, , 13F
推樓上 ︿︿
07/26 22:29, 13F
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07/26 23:35, , 14F
但是因為沒辦法做crosslink 所以才用這樣　怕coIP另一個
07/26 23:35, 14F
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07/26 23:35, , 15F
也是anti-mouse
07/26 23:35, 15F
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