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討論串[求救]IP抓不到target protien
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#4
Re: [求救]IP抓不到target protien
推噓2(2推 0噓 3→)留言5則，0人參與, 最新作者bider (買沉木)時間17年前 (2008/07/27 21:24), 編輯資訊
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應該這樣說. antigen用的 target protien Ab. 他的2抗是 anti-mouse. W是用 rabbit anti-goat的2抗. 是為了怕認到IP Ab 的heavy chain light chain才用不同2抗. 是的. 但是由哪一種動物所做成的抗體應該沒有什麼差別吧
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#3
Re: [求救]IP抓不到target protien
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者sisyphus (變形蟲)時間17年前 (2008/07/27 21:04), 編輯資訊
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今天考完試剛好有時間來研究一下. 首先你的antigen是mouse protein. 1st ab 是goat anti mouse. 2nd ab 是XX anti goat 這樣嗎?. 根據我遙遠的記憶(不好意思我好久沒作了@"@). 通常都會寫抗體的的物種(吧?). 這樣可以很清楚的表達每個
(還有189個字)
#2
Re: [求救]IP抓不到target protien
推噓1(1推 0噓 3→)留言4則，0人參與, 最新作者wangba (原來...)時間17年前 (2008/07/26 07:08), 編輯資訊
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有一個方法可以試試看. 先用pre-immune的serium把ㄧ些nonspecific的protein去掉. 例如你的例子就是拿沒有打過protein的老鼠的serium. 加入beads之後離心完的上清液再加入你的monoclonal 1st antibody. 如此就可以去除雜band. 不
#1
[求救]IP抓不到target protien
推噓3(3推 0噓 12→)留言15則，0人參與, 最新作者bider (買沉木)時間17年前 (2008/07/25 22:28), 編輯資訊
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小弟這幾天做IP. 用monoclonal anti-mouse的1抗. polyclonal anti-goat的2抗. 結果western出來結果很多雜band. 想請問有沒有前輩有類似經驗的可以解決@@. 按理來說. 不同的Fc應該不會有問題才對. 是因為polyclonal造成的嗎?. --
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