Re: [求救]FITC的label方法
※ 引述《momolin1126 (阿毛)》之銘言：
: 請問板上的各位大大們
: FITC該怎麼正確地label上目標蛋白呢??
: 有什麼特定的Buffer環境嗎??
: 有些paper上有說不能用含有tris的Buffer不然FITC會跟tris反應鍵結
: 所以我是在二次水的環境下加入FITC分子跟目標蛋白
: 然後過濾掉沒label上的
: 可是將Sample跑膠結果卻無螢光反應 ><"
: 過濾後的sample中明明也有螢光反應
: 跑完膠卻消失了 染色後蛋白質也還在
: 有哪位大大可以指點一下嗎??
: 不知道是FITC分子沒有label上目標蛋白還是怎麼了....?
: 因為老師不喜歡用kit 所以是直接買FITC分子做的實驗
下列是我的建議 僅供參考.
FITC的functional group是isothiocyanate,可以直接與一級銨或者硫醇基反應.
使用phosphate buffer (20mM, pH7.4)當作反應的環境可同時確保protein的穩定性
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