[求救]FITC的label方法

看板Biotech作者 (阿毛)時間17年前 (2008/06/03 16:52), 編輯推噓4(4推 0噓 4→)
留言8則, 6人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
請問板上的各位大大們 FITC該怎麼正確地label上目標蛋白呢?? 有什麼特定的Buffer環境嗎?? 有些paper上有說不能用含有tris的Buffer不然FITC會跟tris反應鍵結 所以我是在二次水的環境下加入FITC分子跟目標蛋白 然後過濾掉沒label上的 可是將Sample跑膠結果卻無螢光反應 ><" 過濾後的sample中明明也有螢光反應 跑完膠卻消失了 染色後蛋白質也還在 有哪位大大可以指點一下嗎?? 不知道是FITC分子沒有label上目標蛋白還是怎麼了....? 因為老師不喜歡用kit 所以是直接買FITC分子做的實驗 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.130.189.49
推
06/03 18:44, , 1F
FITC上有離去基嗎? 目標蛋白有可以被攻擊的地方嗎?
06/03 18:44, 1F
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06/03 18:45, , 2F
細部我都忘了..兩年前有看過學長label FITC....
06/03 18:45, 2F
推
06/03 22:40, , 3F
染蛋白不知 染菌的話要先用ACETONE 溶解，泡在PH 9
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的0.1 M NaHCO3 染1h，之後再洗掉。
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06/03 23:13, , 5F
我用水可以耶@@" 雖然沒純化 用質譜看是有加上去
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推
06/04 20:54, , 6F
FITC要在鹼性環境下作用
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06/06 22:00, , 7F
謝謝大家的回答 我用各位說的Buffer環境試試看
06/06 22:00, 7F
推
06/14 01:51, , 8F
買FITC-NHS ester與NH2直接反應
06/14 01:51, 8F
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文章代碼(AID): #18HGOzx6 (Biotech)
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