Re: [求救] 共同免疫沉澱法 "IP" 的問題想請教!!

看板Biotech作者 (孤獨何緣)時間17年前 (2008/06/06 03:13), 編輯推噓3(304)
留言7則, 3人參與, 最新討論串2/3 (看更多)
※ 引述《AronYA (我也要兩人的幸福)》之銘言: : 當我把抗體 bis 以及 cell lyse混好反應隔天, : 接著就是離心取得以上三者沉澱的混合物後, : 會加入sample buffer加熱處理, : 接著離心抽上清液做SDS PAGE分析。 : 但就在這一步驟中, : 常常在為了吸取上清液又要避開吸到bis的過程中, : 導致每個sample的loading量很難控制。 : 想請教有沒有更好的方式可以處理loading sample, : 或者 : 乾脆就連同bis跟sample buffer混勻後, : 就一起loading到gel中去跑電泳嗎? : 感謝 ~ 我們家現在loading sample都是用0.05ml的針在loading (不是打針用的那種) 他的針頭就很小 所以不怕會有吸到bis的問題 然後它的針頭也不會傷害到人(沒那麼細...) (而且珠珠不是很大?一般的yellow tip也吸不太起來吧?!) 我也有個問題 IP要放多久阿?? 以前會放o/n 現在老師說好像是一~兩個小時就可以了?? -- █◣ 要記得阿! ◥█ 有個女的會邊搖邊笑 笑到你心裡發寒........ ╯└ ((· >< η ∵ ∵ ∵∵∵∵ miwy ┌┐◢▃)) 囧 囧囧囧........100連斬達成!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 123.252.18.224

06/06 09:13, , 1F
一兩個小時就可以了. 你可以比較看看
06/06 09:13, 1F

06/07 00:53, , 2F
不一定啦
06/07 00:53, 2F

06/08 16:48, , 3F
小弟我是先將Bis與一抗作用2hrs, 再加入cell lysate作用
06/08 16:48, 3F

06/08 16:48, , 4F
作用overnight...
06/08 16:48, 4F

06/08 16:53, , 5F
以上都是於4oC作用...另外, 小弟實驗室所使用的Bis是
06/08 16:53, 5F

06/08 16:53, , 6F
GE Healthcare所出產的, 顆粒似乎較小, 用yellow tip
06/08 16:53, 6F

06/08 16:55, , 7F
吸取的話, 會吸取到Bis, 所以小弟我都最高速離心
06/08 16:55, 7F
文章代碼(AID): #18I3ha1V (Biotech)
文章代碼(AID): #18I3ha1V (Biotech)