Re: [方法] 請問注射cell line至小鼠產生腫瘤模式갠…
43~
>1.原po利用的Lewis lung cancer cell不知是那種tumor cell line
> 如果我猜的沒錯 跟我以前應該使用應該相去不遠
> 我是用B?/F10 nad B?/F0 都是melanoma cell line (lung cancer cell line)
這隻細胞的名稱 是B16/F10，非常惡性的cell line.
兩個差別在 metastasis 能力強弱 (F10強)
如果是這類Cell 以下的資料 可提供原po一些方向
43，抱歉~
> (3) solution的量: 我都控制在80~120ul 通常我都用100ul
> 這點 我覺得200ul的確是上限 原因:
> 一隻小鼠的血液量約在1.5~2.3ml 如果妳一次超過總血量1/10以上的
> dilute 會對mice產生蠻大的影響在 blood system
如果給了過多的saline，會造成老鼠有shock現像
(有些shock model就是這樣做的!)
> 但以前我在練習tail vein injection 一次打1ml的Saline是沒問題的
> 所以原po可能在injection 可以再下點功夫改進一下
> 個人經驗上,建議控制100ul真的是差不多了
> 至於細胞濃度上 應該是還好 我也有打過7次方
> 應不致於thrombosis跟對老鼠有太大傷害 反倒是i.v打進去時
> 注意一下soln.溫度 太冰 老鼠會馬上卦給妳看
> (4) 有沒有injection應該是不難看出 如果是尾巴 可以在打進去的瞬間看到
> 尾巴變白 血流會通過 但是妳如果是打B6就 觀查上有點難度
> 通常還有一種是利用眼窩靜脈叢注射 我比較喜歡那種打法
想請問一下，利用眼窩靜脈叢注射要如何進行？
是直接打到老鼠的眼窩就可以了嗎？
> 因為B6的尾巴不好打
> (5) 關於針頭大小 是否會影響存活率 我有做過實驗
> 18G.26G.跟30G 其實並不會影響 我建議用一般1CC針筒附的那種
> 應該是26G罷 就足夠了 30G 感覺上 阻力大多了
我用的是29G 胰島空針，可是很容易一開始很順，過一下就塞住了
是不是有怎樣的姿勢是容易讓注射保持穩定?
還想請問一下，不管是tumor或是藥物，
都可以在眼窩靜脈注射這種方式去注射嗎？
> (6) 關於PBS跟normal saline 其實如果練習上來講 不建議用PBS
> 實驗的經驗上 PBS比起saline 老鼠似乎有時會因為打PBS而卦點
> 或許是 因為鹽類的影響 所以 可以注意一下
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