Re: [問題] buffer pH值 會怪異的上升!! (已解決)

看板Biotech作者 (小小的小快樂)時間18年前 (2008/02/28 18:02), 編輯推噓2(2推 0噓 8→)
留言10則, 2人參與, 最新討論串2/2 (看更多)
(((原文恕刪...))) 藉著這個標題我有一個問題想請教各位板友~ 如果Tris-Hcl會隨著溫度影響pH值 那以後注膠做SDS-PAGE的時候是不是都要維持調Tris-Hcl的那個溫度才行? 不然這樣Gel的pH值不對,跑出來的band是不是也會受到影響? 而running buffer也有含Tris-base，在冰箱冰存與室溫回溫是否pH值也會改變? (雖然我們家running buffer是會測pH值，但是不調整pH值) 因為之前用GE的電泳槽(Amersham SE250) 跑完有的時候會在Gel上看到藍色的dye變成黃色的現象 跟GE技術人員請教以及查看了板上的精華區，都說是pH值的改變造成的 原先我們以為是電泳過熱現象造成，所以置於冰上跑(我們cold room壞掉) 現在看到這篇文章突然想到，會不會是溫度造成pH值改變而產生這樣的結果 黃掉的地方似乎就不會在電泳往下跑了，附近的band也會被拖成歪歪的 要怎麼改善才好呢??? 希望有經驗或的板友可以給一點改善的建議...謝謝<(_ _)> -- ╮ ‧ ﹒ ║ 、 。 ﹒ ’ ║‧ ＊ ╪ ┼ ║ ╭═╮╠═╮╭═╮ ╔═╮╔═╮ ◣ ◢ ║ ﹒║ ║ ║ ║ ╠═╝║﹒║╭═╣ ║ ║║ ║║ ║ ▕︵ ︵▏ ╰═╯╰ ╰ ╰ ╰ ╰═╯╰ ╰╰═╰ ╠═╯╠═╯╰═╣ ▋= - = ▎ ． 。 ． ╩ ﹒ ╩ ‘ ╰─╯ ▄▃▄ ． ‥ ◣﹚ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.175.170
推
02/28 18:52, , 1F
雖然說"Tris-Hcl會隨著溫度影響pH值"不能說全錯,但事實上是
02/28 18:52, 1F
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02/28 18:53, , 2F
pH值的量測值會隨著溫度而改變,"而且"在滴定調整pH值的酸鹼
02/28 18:53, 2F
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02/28 18:55, , 3F
中和過程的放熱反應是造成無法確認pH值的主因,你完全失焦了
02/28 18:55, 3F
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02/28 18:58, , 4F
另外,有些人調Tris會因為調過頭又加鹼,過多的酸鹼中和產生
02/28 18:58, 4F
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02/28 18:59, , 5F
的鹽,就很有可能使Gel產生溫度過高,band醜醜的情況
02/28 18:59, 5F
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02/28 19:01, , 6F
要解決問題去別的lab就好了,這普遍的技術沒你想得這麼複雜
02/28 19:01, 6F
推
02/29 22:44, , 7F
呃..我這幾天才碰到這個問題，重配過Running Buffer就正
02/29 22:44, 7F
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02/29 22:45, , 8F
常了。在發現之前跟老師討論過，也可能是電泳系統的電壓
02/29 22:45, 8F
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02/29 22:46, , 9F
太高或是電泳槽白金線的問題。
02/29 22:46, 9F
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02/29 22:48, , 10F
我的狀況的話，應該是O/N的時候耍笨.....= =;;;
02/29 22:48, 10F
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文章代碼(AID): #17neQRYV (Biotech)
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