[問題] buffer pH值會怪異的上升!! (已解決)

看板Biotech作者latte366 ( )時間18年前 (2008/02/28 02:31)推噓1(1推 0噓 6→)

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關於配western的SDS-Gel 的buffer (濃度皆為1M) 配stacking gel (上膠) 的 tris-base buffer pH為6.8 配running gel (下膠) 的 tris-base buffer pH為8.8 問題來了最近忽然想到這兩種buffer回不會像養細胞的medium一樣配一段時間隨著暴露空氣的時間頻率增加 pH值會會來越高於是拿著四個月前配的這兩罐buffer去重測pH值果然配上膠的 pH 從 6.8 --> 7.6 配下膠的 pH 從 8.8 --> 9.4 我給自己的解釋是雖然都有冰4度C冰箱不過或許是放太久吧沒關係! 立刻重配配完之後看著pH meter 顯示 6.8 與 8.8 爽!! 馬上用新的buffer做兩片膠來跑等膠凝的過程不曉得哪根筋又不對又拿著這兩罐buffer再去測PH值重點來了!! pH居然又升高了 6.8--> 7.2 8.8--> 9.1 疑惑的當下拿起手邊的HCL (6N)做滴定 (用濃的是怕體積改變太多影響Tris濃度) OK 沒兩下滴定回原來pH 可是當我拿起罐子搖一搖再mix 再重新測PH 神奇的是 pH值又上升了!!!! 我是沒有測一直搖一直搖它可以上升到什麼樣的程度啦不過我猜到一定的程度後應該就會停下來 (不然就爆表啦!) 補充: 1.不大可能是藥品壞掉因為學長姐們也適用同一罐配雖然他們第一次測完pH後就再也沒再測過不過western也還是順順的跑阿 2.HCL也不大可能有問題從12N會冒煙的那種熱騰騰配好的聞起來很新鮮阿! XD 3.pH meter壞掉的可能性也很低測MQ純水 pH沒問題而且搖一搖晃一晃 pH也不會升高 4.glycin-base 有完全溶解了 stir-bar讓它轉滿久的至少我肉眼看不出有沉澱所以應該也不是配成過飽合的沉澱導致話說pH可以變了又變變了又變嗎? 我已經在考慮要不要以後做的時候都現配了......Orz 請問各位前輩有類似的情形嗎? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.93.52 ※ 編輯: latte366 來自: 140.116.93.52 (02/28 02:38)

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dankai

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