Re: [求救] Medium跑western
※ 引述《boblu.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (六百)》之銘言：
: ※ 引述《ballycotton7.bbs@ptt.cc (昂 布拉股)》之銘言：
: > 最近要看一些外送到Medium中的protein
: > 所以將medium拿去跑western
: > 但是總是偶而會有band 較多時候有時候都沒有訊號 而且片子的background都髒髒的
: > 我的方法是 先將約100ul的Medium加入loading dye之後下去煮過
: > 將體積煮至40~50之後 loading
: > 但是有時候煮過會發現底部有一些藍色的沉澱物
: > 但是我還是全部loading下去
: 這種煮到乾的做法有文獻可考嗎？
: 感覺有點可怕
: 而且我直覺認為鹽類濃度的改變會對結果造成一些難以預期的影響
: 如果是我 我會用 centricon 之類的東西來濃縮啦...
: 或者是作 IP or IP-western
我想問你的是...你的medium裡有沒有serum..
聚我所知..serum影響很大
跑出來會有黑色ㄧ團
我後來是用serum free...
取2-3ml的medium濃縮至50-70 ul後加 loading dye煮
然後用well比較大的去跑
我是上層膠配比較長(也就是下層膠要比較短)
然後讓他跑一下下之後再把沒loading完的load完
^^
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