Re: [求救>>為什麼用pCRII-TOPO cloning vector꘠…

看板Biotech作者 (seal)時間18年前 (2008/01/31 13:01), 編輯推噓3(303)
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※ 引述《seal0413 (seal)》之銘言: : pCRII-TOPO聽說是最好接也較貴的cloning系統 : 我的pcr product 大約 140bp左右 : 我挑藍白有挑到 : 抽plasmid 也有比vector高一點(我跑膠跑0.8%且第一條DYE跳海後又多跑一下) : 只是去切enzyme ECO1(VECTOR上的) : 就怎樣也切不出 140bp左右的位置 : 請各位有用過TOPO的大大幫忙 : 感謝不盡^^ 我是原po 因為我最近這個問題解決了 所以說po來和大家分享 其實啊 切不動的原因是因為 pCRII-TOPO kit過期了 因為我家學弟也挑不到 所以我老闆就說kit重定再做一次 重定時我有問廠商 廠商說 此kit保存期限最多是4-6個月 假如你重覆使用拿進拿出(有放冰寶) 保存的壽命會更減少 因為我們家的kit已經放了1年多 所以亂接一些東西進去是很正常的 買了新kit 實驗終於是做出來 只是很感概的 在一開始實驗做不出來的同時只有重做再重做 又有誰會先想到kit的問題呢 我們實驗花了3個月才找到問題 其中我試了2次 我家學弟試了3次 浪費很多時間 也跑了很多gel和mini kit ><" 總之有人說過 "實驗那麼好做就不會輪到你來做" 雖然是如此 很多時候 還是滿無奈的 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.128.140.71

01/31 13:07, , 1F
這就是經驗(茶~),不過你們都沒想到要作control嗎?
01/31 13:07, 1F

01/31 13:18, , 2F
就是因為有做才挑不到...老闆說"再做一次吧"
01/31 13:18, 2F

01/31 13:19, , 3F
有做才知道自己沒挑到><"只是沒想到會是kit的問題
01/31 13:19, 3F

01/31 17:53, , 4F
有時候我都會問業務比較直接,不過國外品牌在台灣好像都
01/31 17:53, 4F

01/31 17:54, , 5F
沒有自己的lab可以測試,所以後來我都買國產品居多了1
01/31 17:54, 5F

01/31 23:02, , 6F
這告訴我們要做實驗前要記得先檢查保存期限與存放位置
01/31 23:02, 6F
文章代碼(AID): #17eLOzlc (Biotech)
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