Re: [求救] deletion情況的primer設計
|<del>|
5'atacatatatgtac...tgtacaggtagcaatatacagtacacagaaacatctgc...aatacccctgaacat 3'
3'tatgtatatacatg...acatgtccatcgttatatgtcatgtgtctttgtagacg...ttatggggacttgta 5'
1st round PCR:
two individual PCR reactions, template DNA=the target gene
set#1:
primer: atacatatatgtac
primer: acatgtccatcgttatgtgtctttgtagacg
set#2:
primer: tgtacaggtagcaatacacagaaacatctgc
primer: ttatggggacttgta
Purify the PCR products of set#1 and set#2
2nd round PCR:
template=purified PCR products of set#1 and set#2
primer: atacatatatgtac
primer: ttatggggacttgta
Product of the 2nd round PCR should be
the target gene without the deleted fragment
※ 引述《worshiper (簡單 就好了)》之銘言：
: 我是新手 所以沒設計過相關的東西
: 現在有個gene想delete中間的一段 不知道該怎麼樣來設計
: 聽人家說設計的primer要有overlap到時候才能接成完整的片段
: 不過我聽不是很懂 能不能有人幫我解釋一下 舉個例給我看啊 拜託了
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◆ From: 140.109.32.9
※ 編輯: cyken 來自: 140.109.32.9 (01/29 14:30)
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推
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