Re: [求救] Cell seeding怎麼樣都不均勻.....
※ 引述《changyaowen (研究生活)》之銘言：
: ※ 引述《wadewang (小龜)》之銘言：
: : 已經種到快發瘋了 看了之前的討論也沒有頭緒
: : 現在的情況是種10cm dish和75T flask都沒問題
: : 問題都出在3.5cm dish和 24well plate
: : seeding的方法是
: : 3.5cm dish是先加入適量medium 然後將細胞液均勻滴在dish上 總體積約1ml
: : 然後十字搖法，前後3次左右3次，重複3次 搖晃時間差約為1秒
: : 24well plate則是將細胞稀釋到500ul的體積 然後均勻滴進去
: : 然後一樣十字搖法，前後3次左右3次，重複3次 搖晃時間差約為1秒
: : 下場就是細胞都聚在周圍
: : 中間細胞都很少
: : 到底應該怎麼搖才能均勻阿
: 基本上 我覺得上述的方法 應該不會有不勻的情況
: 如果真的不行的話 我是會在偷懶的時後這樣做
: 就是 假設一個WELL要10CC的量(total medium with cells for culture)
: 就直接將妳要細胞數先在tube diulte到10cc
: mix 均勻後 直接加入well 如此volume很大又先mix均勻的情況下
: 相信不怎需要搖應該是均勻且可以直接culture
: 以上純屬小弟心得 ^^
如果是 24 well 的話，我會用 1ml tip 直接在 well 中 pipet 均勻後
"靜置"
就放在 larminar flow 裡不要動喔 (我的細胞很耐)
放個 30min~1hr，他就不太會動了，再放入 incubator
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◆ From: 124.8.83.70
推
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