Re: [求救] 掃描式電子顯微鏡量測細胞之固定動作

看板Biotech作者 (破渡渡)時間18年前 (2008/01/22 21:37), 編輯推噓3(304)
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※ 引述《qkla (努力阿)》之銘言: : 我想請問高手,因為sem我沒做過也沒看過 : 但學長是使用甲醛來固定高分子薄膜上面的細胞 : 分別40%,50%....這樣固定 : 所謂固定是怎樣呢,是將薄膜浸入甲醛一段時間這樣就可以了嗎 : ,還有固定完了的臨界乾燥手續,有強者可以說明看看嗎 ? : 感謝大家 我不是高手,不過可以給你一點建議 一般固定是為了防止細胞在接下來的處理步驟過程中變形 所以我們會使用 paraformaldehyde 以及 glutaldehyde 做固定(可能拼錯) 甚至再使用 osmium 固定,防止細胞在脫水的時候變形 這邊濃度跟固定時間都依照樣品的不同而不同 我想你可以參考實驗室學長使用的濃度 但 formaldehyde 絕對不可能是 40 or 50%...... 我想你這裡所謂的 40%, 50%... 指的應該是接下來脫水的步驟 因為樣品在上 CPD 前必須經過 ethanol or acetone 的脫水 這個時候我們會使用連續不同濃度的 ethanol or acetone 來脫水 因為你的 sample 是固定在特殊的薄膜上 我不知道你的問題在哪裡,也不知道你是固定在什麼樣的材料上 如果你還需要什麼樣的建議或幫忙 也許你可以把問題描述的更詳細一些 這樣我們也比較好之道你需要的是什麼樣的東西~~ -- 琴鍵有琴藝無 琴鍵無止盡,彈不出弦律......那是上帝之琴═══╩╝║ ╚══ ══╗ --The Legend of 1900 ╚╗ ╠══ http://pooldodo.blogspot.com/ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 59.112.5.239

01/23 01:12, , 1F
glutaradehyde吧...真的拼錯
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01/23 08:03, , 2F
這個字我每次都會拼錯...所以先預告了 結果還是錯了 orz
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01/23 10:18, , 3F
沒關係,倒是一樓也要加加油啦 Glutaraldehyde
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01/23 23:50, , 4F
通常好像是用P4G5 分別是4%跟5%
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01/24 06:06, , 5F
我是用P4, G2.5 G濃度高固定快,但有時候會處裡過度
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01/24 06:06, , 6F
所以也可以在冰上反應,把反應時間拉長
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01/24 06:07, , 7F
總之對每種樣品其實配方都不一樣 XD
01/24 06:07, 7F
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