[求救]Protein從SDS-PAGEtransfer至PVDF的問題

看板Biotech作者 (willie)時間18年前 (2008/01/12 20:45), 編輯推噓2(205)
留言7則, 3人參與, 最新討論串1/3 (看更多)
請問各位, 我在做SDS-PAGE transfer至PVDF時, 發現我的Pre-stained marker變得很淡, 因此想請教各位, protein有可能transfer過頭而離開PVDF嗎? 還是變淡是因為染劑脫離protein而已? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.253.121

01/12 20:55, , 1F
用啥方法transfer? 過久的確是會讓ptn跑過頭~但以往經驗
01/12 20:55, 1F

01/12 20:56, , 2F
transfer完marker是會變淡~但membrane上仍有,做完WB後可
01/12 20:56, 2F

01/12 20:58, , 3F
染色看看
01/12 20:58, 3F

01/12 21:02, , 4F
marker都會有建議用量吧@@
01/12 21:02, 4F

01/12 21:07, , 5F
怕跑過頭,可以用2張PVDF看看有沒有跑過頭,但是一般來說不會
01/12 21:07, 5F

01/12 21:09, , 6F
變淡是正常,因為膠跟膜之間是有空隙的,不是100%貼合...
01/12 21:09, 6F

01/12 21:11, , 7F
還有新買的marker比較不會有這種現象,會比較鮮豔...
01/12 21:11, 7F
文章代碼(AID): #17YBPgAg (Biotech)
文章代碼(AID): #17YBPgAg (Biotech)