[求救]IHC的background消不掉

看板Biotech作者yingchi (腦殘無極限)時間18年前 (2007/12/27 17:12)推噓7(7推 0噓 5→)

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小弟目前正在做一些石蠟切片的IHC，所使用的是VECTASTAIN 的ABC kit，以及利用DAB呈色染完之後，再利用Hematoxyline做細胞核的染色，現在主要有兩個問題： (1)經過DAB呈色後，整個組織都會呈現紅褐色，顯微鏡下，也看不太到明顯特別黑的區域我呈色時間只用一分鐘。 (2)利用hematoxyline染色，卻染不出細胞核，而整個組織顏色用肉眼看也與DAB染色後沒有差距，理論上不是應該要變成藍色嗎？在此，想請問有經驗的前輩，我看過期刊裡面的IHC，他們所貼出的照片，Background似乎都會呈現藍色，但是我現在卻做不太出來，反而是整個組織呈現紅褐色，我也試過用commercial的blocking buffer，仍然無法解決這樣的問題，還請各位指教 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.109.40.11

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