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討論串[求救]IHC的background消不掉
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#4
Re: [求救]IHC的background消不掉
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者oopa (11)時間18年前 (2008/01/03 12:07), 編輯資訊
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就個人的經驗而言：. 在試新條件時，我都會同時作一片negative control. 此negative control的定義是，利用相鄰的切片(或位置儘量不要差太遠)，. 不加一抗(只用diluent)，或加與一抗相同來源的IgG取代一抗進行incubation. 其餘步驟均與原定的步驟相同(包
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#3
Re: [求救]IHC的background消不掉
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者iiidns (大野狼)時間18年前 (2008/01/02 14:46), 編輯資訊
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做DAB呈色 用H2O2以去除內生性的proxidase是很重要的. 但是如果是做螢光染色 這各步驟可以省略. 還有 可以試試看用 H2O2的步驟 最後反應用螢光呈色. 再利用Roche的 Conver-POD 就可以針對 FITC的螢光在接合後. 用DAB呈色. 這各我以前也有玩過 至少一個片子
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#2
Re: [求救]IHC的background消不掉
推噓4(4推 0噓 2→)留言6則，0人參與, 最新作者yingchi (腦殘無極限)時間18年前 (2007/12/28 16:37), 編輯資訊
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oopa: 如果方便可以提供你是用哪種組織及blocking的條件,會比較 12/27. oopa: 容易找問題,或許有些人有類似的經驗. oopa: background可能來自組織本身的biotin,此時就要從blocking著手. everything47: 你的組織本身就有顏色嗎? 會不會是
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#1
[求救]IHC的background消不掉
推噓7(7推 0噓 5→)留言12則，0人參與, 最新作者yingchi (腦殘無極限)時間18年前 (2007/12/27 17:12), 編輯資訊
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小弟目前正在做一些石蠟切片的IHC，. 所使用的是VECTASTAIN 的ABC kit，以及利用DAB呈色. 染完之後，再利用Hematoxyline做細胞核的染色，. 現在主要有兩個問題：. (1)經過DAB呈色後，整個組織都會呈現紅褐色，顯微鏡下，也看不太到明顯特別黑的區域. 我呈色時間只用一
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