Re: [求救] 有關double digestion先後順序
※ 引述《leoblack (朋友看太重的猫)》之銘言：
: 如題
: 現在我想要作double digestion
: 所選用的RE分別是ApaI和XmaI
: 兩個特性都是用buffer 4 + BSA
: 但問題來了
: ApaI作用時需要在25℃,如果在37℃,則half-life為30分鐘
: 而XmaI作用所需溫度為正常的37℃
: 所以我想問~有沒有說先切溫度高的再切溫度低的這種建議?!
: (我是要2種RE分次切,並沒有要同時加在一起切)
: 個人第一個直覺是想先切溫度低的再切高的
: 這樣incubator溫度設定可以一路往上加,不用先加溫再降溫
: 好啦~我承認我真的有些龜毛^^"~
: 感謝了
我在想...如果ApaI是可以被加熱inhibt的話那可以用它沏完後先加熱
去活性 再加XmaI作用...另外我是覺得啦...如果是我的話
我會先切高溫再沏低溫..因為我想低溫的enzyme可能會在高溫環境下亂切
雖然她活不久但是還是有可能造成傷害...可能會讓ligation不順利...
祝你實驗順利唷:)
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◆ From: 140.113.55.220
推
11/08 13:31, , 1F
11/08 13:31, 1F
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