看板 [ Biotech ]
討論串[求救] 有關double digestion先後順序
共 3 篇文章
內容預覽： 開啟 | 關閉 | 只限未讀
首頁
上一頁
1
下一頁
尾頁
#3
Re: [求救] 有關double digestion先後順序
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者mournermind (阿矇)時間18年前 (2007/11/07 23:21), 編輯資訊
0
0
0
內容預覽:
我在想...如果ApaI是可以被加熱inhibt的話那可以用它沏完後先加熱. 去活性 再加XmaI作用...另外我是覺得啦...如果是我的話. 我會先切高溫再沏低溫..因為我想低溫的enzyme可能會在高溫環境下亂切. 雖然她活不久但是還是有可能造成傷害...可能會讓ligation不順利....
#2
Re: [求救] 有關double digestion先後順序
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者chengtachun (>0<)時間18年前 (2007/11/05 21:46), 編輯資訊
0
0
0
內容預覽:
我的看法是這樣,. 先切XmaI@37℃,再補buffer+BSA跟ApaI,切ApaI@25℃. 建議你看NEB的目錄說明然後跟其他人討論之後再決定. 因為要看XmaI@25℃會不會出問題. 給你我的經驗,切SfiI@50℃ in buf#2 + SalI@37℃ in buf#3. NEB的目錄
(還有153個字)
#1
[求救] 有關double digestion先後順序
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者leoblack (朋友看太重的猫)時間18年前 (2007/11/05 20:25), 編輯資訊
0
0
0
內容預覽:
如題. 現在我想要作double digestion. 所選用的RE分別是ApaI和XmaI. 兩個特性都是用buffer 4 + BSA. 但問題來了. ApaI作用時需要在25℃,如果在37℃,則half-life為30分鐘. 而XmaI作用所需溫度為正常的37℃. 所以我想問~有沒有說先切溫度
(還有80個字)
首頁
上一頁
1
下一頁
尾頁