Re: [問題] 想問大家induction時所選擇的OD600值
※ 引述《mournermind (阿矇)》之銘言：
: 我們實驗室長久以來的方法大概就是
: 1. single colony -> 養12hr以上 OD600約1.XX
: 2. 以約1/10的菌液加入新鮮LB中 OD600約0.1 進行refresh
: 3. 約2~3hr後 OD600 約0.5進行IPTG induce
: 4. 取定點時間induced的菌看蛋白表現
: 可是我在pET mannual中所看到的方法大概是
: 1. single colony -> 養到 OD600約 0.5
: 2. 以3ml的菌液加入100ml新鮮LB中進行refresh
: 3. 約2~3hr後 OD600 約0.5 ~ 1 進行IPTG induce
: 4. 取定點時間induced的菌看蛋白表現
補充一下：
1. Single colony -> 2~5mL. OD any, but must be turbid. (it's then
usually >0D 0.5.)
2. spin down if the next media is not LB. -> transfer to 20~ 50mL LB.
3. Typically after 8hrs, it will OVER OD 1.0
4. Transfer into 1L LB. Carefully moniter the OD. ~OD=1.0 to
induce. Usually, it should be ok to induce at around OD 1.0~1.2.
5. Doubling time should not be more than 75min, in my system.
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