Re: [問題] NORTHERN一直做不出來

看板Biotech作者boyo (29大頭)時間18年前 (2007/08/19 01:13)推噓6(6推 0噓 0→)

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※ 引述《kirby0415 ()》之銘言： : 想請問板上有做過NORTHERN的各位 : 我實驗室的NORTHERN不是用kit做的 : 而是自己配northern所需的buffer : 但是最後ECL呈色出來 RNA的地方都反白 : 但我positive control(是DNA)都一直有做出來 : 我當初是以為可能再transfer過程 RNA就degrade了 : 所以去做了dot blot : 但結果仍然一樣　 : 那我又想說也許是我要測的那個RNA　在細胞裡的量太少所以看不到 : 所以我又另外製備了actin probe : 想說actin在細胞裡的量很多　看可不可以再跟probe hybridization到這個邏輯是對的可是你要先檢查你設計出來跟做好的的probe是否可以用方法是先製備一些test用的membrane 然後跑test probe 確定可以用再接下去其他的實驗 : 但是結果一樣　就是RNA又反白 : 我們的probe是用biotin-avidin的方式偵測的 : 所以想請教有經驗的各位 : 我的northern到底是哪裡出了問題？ : 謝謝囉！ -- When you have eliminated the impossible, whatever remains, however improbable, must be the truth. " 四簽名 " 科南道爾 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 211.74.121.81

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pshamrock

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HIbaby

08/19 11:55, , 2^F

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tsubasawolfy

08/19 12:33, , 3^F

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