[問題] NORTHERN一直做不出來

看板Biotech作者時間17年前 (2007/08/18 13:07), 編輯推噓1(101)
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想請問板上有做過NORTHERN的各位 我實驗室的NORTHERN不是用kit做的 而是自己配northern所需的buffer 但是最後ECL呈色出來 RNA的地方都反白 但我positive control(是DNA)都一直有做出來 我當初是以為可能再transfer過程 RNA就degrade了 所以去做了dot blot 但結果仍然一樣  那我又想說也許是我要測的那個RNA 在細胞裡的量太少所以看不到 所以我又另外製備了actin probe 想說actin在細胞裡的量很多 看可不可以再跟probe hybridization到 但是結果一樣 就是RNA又反白 我們的probe是用biotin-avidin的方式偵測的 所以想請教有經驗的各位 我的northern到底是哪裡出了問題? 謝謝囉! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.94.43

08/19 19:03, , 1F
反白的話可能是信號太強了,ECL被消耗掉。
08/19 19:03, 1F

08/20 12:22, , 2F
是喔?那我再去查查看 謝謝~
08/20 12:22, 2F
文章代碼(AID): #16ndw9Dh (Biotech)
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