[求救] 植物DNA的萃取
最近要抽植物的Genomic DNA
可是一直不順跑電永都是smear的情況
把protocol列出來希望有大大可以給予指教
謝謝
1. CTAB 500贡ul + beta-me 40 ul 預熱65℃ 30 min
2. 液態氮研磨植物葉片加入(1)水浴65℃ 2 hr
3. 加入chloroform/isoamyl 24:1 500汹ul,倒轉tube 100次,離心8000 rpm 10min
4. 吸取上清液到新tube,加入chloroform/isoamyl 24:1 500 ul,倒轉tube 100次,離心8000 rpm 10min,共三次
5. 加入isopropanol 500ul,放至-20℃ overnight
6. 離心8000 rpm 10min,4℃,去上清液晾乾
7. 加入TE buffer 500ul 彈至全溶(tip可切斜口)
8. 加入RNase 5汹ul,37℃ 30min
9. 加入isopropanol 500 ul,放至-20℃ 30min
10. 離心8000 rpm 10min去除上清液
11. 70%酒精wash 2次,晾乾
12. 加入TE buffer 200 ul,測OD,跑電泳
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.25.148
推
07/20 17:12, , 1F
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07/22 18:32, , 2F
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