Re: [方法] 如何在plasmid上加Bgl II sites?

看板Biotech作者 (馬車從天上掉下來￾ ￾N)時間18年前 (2007/07/05 01:38), 編輯推噓3(302)
留言5則, 2人參與, 最新討論串3/5 (看更多)
※ 引述《pneumonia.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (JUAN)》之銘言: : ※ 引述《oddesy.bbs@ptt.cc (馬車從天上掉下來￾ ￾N)》之銘言: : > 回到家可以打中文了 呼呼 : > 我沒有作 mutation 想在plasmid 上加Bgl II sites : > 我需要在我的plasmid上加上兩個Bgl II sites 才能跟廠商賣 : > 的vector作ligation : > 會有這個限制是因為現成的vector上的restriction enzyme sites : > 是固定的其中包括Bgl II 而且kit裡有附Bgl II enzyme : > 拜託大家了 : plasmid和 plasmid ligate在一起結果會很奇怪 : 為甚麼要這麼做呢? target gene 在既有的plasmid上 現成的vector上的restriction enzyme sites : 是固定的 其中包括Bgl II 而且kit裡有附Bgl II enzyme commercialized vector 包含reporter gene 手上的plasmid要加兩個Bgl II sites才能把target gene 切下來並和 commercialized kit裡的vector 作ligation 有勞大家讀完 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 68.43.122.205

07/05 02:13, , 1F
傳統的做法是設計兩端帶有BglII的primer做PCR再接過去,或者
07/05 02:13, 1F

07/05 02:16, , 2F
把target跟vector切下來後先blunt處理,再黏起來
07/05 02:16, 2F

07/05 02:19, , 3F
反倒很少用你上述方法,尤其遇到vector都不適切時你怎麼辦?
07/05 02:19, 3F

07/05 07:29, , 4F
thanks
07/05 07:29, 4F
※ 編輯: oddesy 來自: 68.43.122.205 (07/05 07:36)

07/05 07:39, , 5F
kit說明書寫這個vector可以被Bgl II切
07/05 07:39, 5F
文章代碼(AID): #16YziE97 (Biotech)
討論串 (同標題文章)
文章代碼(AID): #16YziE97 (Biotech)