Re: [問題] 請問有人用G418篩選MCF7細胞嗎
※ 引述《aett (一個人旅行...)》之銘言：
: 不知道板上有沒有大大用G418做MCF7 的stable clone?
: 因為我們實驗室在篩選的時候
: 當G418的藥加入 就會大片死亡
: 之後三周篩選出來的細胞並不會因為去掉G418而正常生長增生
: 情況跟我在網路上找到一個人實驗的情形是差不多的
: http://www.bio.net/bionet/mm/cellbiol/1995-September/002800.html
: 可是這問題並沒有人有回應
: 另外一方面我在pubmed上面搜尋有關這方面的資訊
: 也只有少數三四篇有做到
: 可是似乎又沒討論到這些問題
: 真是苦惱呀>"<~
有沒有先試試看不要transfect直接先用不同濃度的G418先殺殺看?
原則上以能在5天至一星期能將90-95%以上細胞殺掉的dose為佳
太低的話會有未被transfected的cells survive下來
太高的話, 細胞來不及表現相關的protein就被宰掉了
還有每個廠牌買到的G418的effect dose不盡相同
這也要注意一下
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