Re: [問題] real-time PCR
沒用過你們那台機器 所以不知道選duplicate的問題怎麼解決
至於會有測不到的 十之八九通常都是pipetting的問題
最快的解決辦法就是不要偷懶，乖乖作master mix
拚一點的話一整組(duplicate或triplicate，我建議最好都是作triplicate)
連template在內都是加到master mix後再分
大概說一下我是怎麼作的好了
假設一個control兩個exp，一個b-actin一個target gene
這樣總共會有9 x 2 x 3(trilicate) + 2(blank) 管
扣掉primer和template其他reagent先整個作一個master mix
分兩半加primer後先各取一管blank的出來
其他各分三組加template
最後才從每一組的master mix裡分到pcr tube裡
這已經是最龜毛的做法了
可是出來結果偶而還是會有差到兩個cycle的
real-time是非常非常sensitive的~~ XD
再來data analysis我都是拿出來自己用excel算
這樣機器只要知道哪個是blank就可以
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