[問題] real-time PCR

看板Biotech作者kyokolove (心想事成)時間18年前 (2007/06/07 09:25)推噓3(3推 0噓 1→)

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最近要新學的可是上機幾次都有問題我是用SYBR green的MIX 而我的template約40ng primer設計在200bp內以下是我上機時的幾個問題 1. 有些sample會undetect 是什麼原因呢??? 而且我有做水的negative control 確定primerOK 2. 請問sample上機後要用機器去標定他要怎麼寫呢機器怎麼知道我的二重複在哪裡??? 這樣講有點不清楚我圖示一下我是同一種基因(geneX) 兩個不同細胞cDNA(A、B)做比較以下是我的操作方法我就load一排 A A B B 然後將四個well框起來按well inspector 選擇detector是誰我就直接按自己gene名稱那個就結束了... 這樣機器是不是不知道二重複在哪裡阿我是不是要在每格多加上A、B的名稱做區分阿??? 3. 可以請各位前輩多給我一點有關做real-time PCR應該注意的事項嗎??? 感覺實驗做不出來常常是小細節的問題... 我真的很迷惘阿@__@ 感謝大家的解答~~~~~~~~~~~~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.25.118.149

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freesoul

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kyokolove

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aggaci

06/07 12:34, , 3^F

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