[求救] 重組蛋白純化後,分子量改變了

看板Biotech作者 (hhyhuang)時間18年前 (2007/05/25 21:27), 編輯推噓2(201)
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最近遇到一個問題,想請教大家: 我表現一個24kDa的protein於Ecoli(BL21DE3) ,跑PAGE與control比較後,的確可以在約24kDa的位置, 看到明顯的band被誘導出來,但是, 進行His純化後,結果原本受IPTG誘導的重組protein 已經不在24kDa的位置了,跑到37kDa 但是,我用抗體又能hybid到37kDa的band, 我懷疑會不會我的protein被磷酸化了,有方法可以讓我的protein回復成 24kDa嗎?或者有方法證明我的重組蛋白在37kDa是因為被磷酸化所造成的嗎? 感激不盡~~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.70.89

05/25 23:08, , 1F
磷酸化分子量應該不會差到那麼大..醣化?
05/25 23:08, 1F

05/25 23:09, , 2F
不然試試看去磷酸化處理..看會不會恢復囉
05/25 23:09, 2F

05/26 00:47, , 3F
dimer? 有加dtt or β-ME?
05/26 00:47, 3F
文章代碼(AID): #16LkHC0F (Biotech)
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