Re: [問題] raw264.7 如何transfect
※ 引述《liuse (充實自己,提昇自己)》之銘言:
: ※ 引述《bluehttp (蝦毀)》之銘言:
: : 最近在養這個細胞
: : 真的是快被他搞死了
: : passage時不管是用tryspin或是用刮的
: : 細胞在數時都不多
: : 實在很難把細胞放大作更多的實驗
: : 而且這個細胞不管用啥方法
: : transfect效率都超低的
: : 不知各位有啥好的方法可以提供
: : 感激不盡阿
: 這是mouse的macrophage
: 印象中我以前用blue tip沖一沖就可以沖下來啊
: 也沒用到trypsin
: 細胞個數的確不會很多
: 趴完還要養個一兩天才會滿
: 而且很容易走樣
: 不能長太滿再趴或是養太久
: transfect我以前都是用lipofectamine 2000
: 效率也不是頂好,我看過的paper也都是用這個
我們實驗室頗常養的 細胞數都還頗多的耶
用tripsin 處理約一分多鐘....用拍的就可以拍下來...(大力點別客氣)
會不會是您一開始拿到的細胞株就不大健康呢
若是精神好的RAW應該是圓呼呼的球狀 如果狀況不好則會有長角的情形發生
trasfect的話 我記得似乎電阻值要夠大 穿透時間才能縮短 減少細胞的損傷
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