Re: [問題] pcr及電泳的問題.......
※ 引述《dnab.bbs@ptt.cc (問個問題)》之銘言：
> 一、我做的基因是人類的drd2、TPH、5-HT2C、ADRA2A、serotonin transporter等基因，
> 想請問一下各位高手，有沒有那個資料庫能查詢這些基因的電泳圖的呢？除了找paper這個
> 方法之外，有無這種電泳資料庫呢？對了，我做的基因都是人家做過的。
> 二、我的電泳結果老是很弱，甚至比primer dimer還弱，請問我能怎麼改進呢？降低
> annealing溫度（可是已經降到50度了耶）、換dna（因為dna老舊嗎？）、稀釋dna？或是
> 減少DNTP的量（因為會搶鎂離子嗎？）？這些我都還沒試過，還有其他方法嗎，這些方法
> 的測試優先次序為何？補充說明我的DNA是口腔棉棒萃取出來的。
> 三、老師跟我說pcr產物要很亮很強才能做RFLP，請問這是真的嗎？是不是切出來之片段
> 還會更弱所以看不到呢？還是說產物不夠亮有變通方法呢？
> 四、爬文發現有些試劑重複凍、融會嚴重影響實驗結果，所以應分裝，所以DNA要分裝，那
> dntp、buffer也會有這麼嚴重的影響嗎？還是說上述兩者較不易壞？
別人的電泳圖通常不會有甚麼用處
可能失敗的原因太多 扯不完
必須先找一個positive control
譬如說從周邊白血球或細胞株抽取大量DNA
如果仍然做不出來 再考慮PCR條件改善
dNTP和buffer較耐凍
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※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
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