Re: [問題] 限制霉實驗的問題...........
※ 引述《ppta (幸福的瞬間)》之銘言:
: 請問一下,我看學長之前的論文,做限制脢實驗,加的各試劑的量有分PCR產物強跟PCR產
: 物弱,請問一般大家在實驗的時候,是怎麼先知道PCR產物強弱的?另外,PCR產物等要
: 加多少怎麼決定?而限制脢加多少怎麼決定?要反應多久怎麼決定?
: 是不是PCR產物、限制脢量、反應時間有一個比例關係,而且跟限制脢的單位切割長度有
: 關?那要怎麼算出這些量呢?
理論是理論,但端看種類而定,不同廠牌影響也很大,新舊也有關
: 再問一下,限制脢是不是可以切久(比方超過一個理想時間),但是不能夠切不足時間。
: 所以時間的話,愈久沒關係。
你切的目的是要做什麼
RFLP?construct?
: 學長現在出國了,所以沒辦法問學長,而且我做的基因位置跟他不一樣,請求各位高手幫
: 忙,謝謝
就試呀!實驗就是試了失敗,想一想又試
不知道時間就固定unit做time-dependent
如果效果不彰看要不要加BSA
不確定位置就load一個不切
如果覺得怪就去要一個plasmid來做對照
另外PCR強弱是能最佳化的
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 221.120.41.216
討論串 (同標題文章)