Re: [問題] 關於His tag
※ 引述《countonme (that's just me)》之銘言：
: His tag通常都是在fusion protein的N端或C端
: 如果我將His tag在N端的fusion protein前面再加入28個氨基酸
: 也是就是說我的His tag不在N端的頭，而是從N端的第29個氨基酸開始
: 那麼純化時過Ni column還會被抓到嗎？
: 感謝所有曾有類似經驗的先知分享你的經驗 ^^
如果你是在 denature 的狀態下純化,我猜應該影響不大
要是在 native 的狀況下純化的話,那就不一定了
要看整體的蛋白構型,來決定His-tag暴露的情況而定
如果His-tag比較暴露在表面,那就應該沒差,不然你就flow through多過幾次
or binding 久一點摟
你前面多加的28個AA有人有做過嗎?
你要不要先去參考看看再決定 :)
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