討論串[問題] 關於His tag
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推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者freshing (hold on ~~)時間19年前 (2007/04/08 08:20), 編輯資訊
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如果你是在 denature 的狀態下純化,我猜應該影響不大. 要是在 native 的狀況下純化的話,那就不一定了. 要看整體的蛋白構型,來決定His-tag暴露的情況而定. 如果His-tag比較暴露在表面,那就應該沒差,不然你就flow through多過幾次. or binding 久一點摟

推噓2(2推 0噓 0→)留言2則,0人參與, 最新作者countonme (that's just me)時間19年前 (2007/04/08 01:02), 編輯資訊
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His tag通常都是在fusion protein的N端或C端. 如果我將His tag在N端的fusion protein前面再加入28個氨基酸. 也是就是說我的His tag不在N端的頭,而是從N端的第29個氨基酸開始. 那麼純化時過Ni column還會被抓到嗎?. 感謝所有曾有類似經驗的先
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