Re: [問題] 突發奇想細菌作的recombinant GFP會亮嗎?
※ 引述《leoblack (風的使者)》之銘言：
: ※ 引述《Mouseking (叫我老鼠王....-_-)》之銘言：
: : 請教各位先進
: : 如果我把EGFP放進BL21
: : IPTG induction後
: : 可以純化出一管會發螢光的蛋白質嗎？
: : 一時好奇......有人試過嗎？謝謝？
: 可以,我看人作過~
: 但是要純化出那些EGFP有點困難
: 你要怎麼純化呢?!
: 想在EGFP後面加tag嘛?!
對
: 另外純化後你怎麼保存呢?!
50% glycerol冰-20度
: 會發螢光的蛋白通常是有不穩定的電子結構在
: 所以在受到紫外光照射後會放能產生可見螢光
: 所以這後續的純化及保存問題可能要再進一步討論
: ---以下是發牢騷內容,易激動者勿看---
: 另外
: 我個人反倒是對於原po會想到這樣的問題
: 抱持讚賞的態度
: 念生物的都知道,沒有"絕對"這件事
: 不是什麼觀念都是可以直接平行地轉移到其他不同生物體上
: 很多實驗是要作過才知道可行不可行
: 個人是不知道原po在實驗室裡待過多久了
: 實驗經驗有多少了
: 但不可否認的,所有的實驗對於沒作過的人來說
: 都可以算是novel的實驗
: 今天會有這樣的疑問表示有創意的點子產生
: (至少是對他個人而言)
: 他有在想,有想去嘗試
: 但唯一欠缺沒做到的,就是去"查資料"
: 去查查看是否有前人作過類似的實驗
: 至於那些會覺得"這是什麼爛問題?"
: 會覺得問這種問題很沒程度的人
: 我覺得這有點"倚老賣老"的心態
: 或是像老鳥瞧不起菜鳥的心態~
: 或許是因為你作過這個實驗或相類似的實驗,所以你知道可以
: 或許你只是單純的推理覺得應該可行,所以你覺得可以
: 但,不懂為什麼要去撻伐提出這個疑問的人?!
: 別人就是沒作過嘛,阿是不能提出疑問喔
: 沒必要酸別人吧~
: 以上
通常新手做這個實驗拿到protein第一個反應是 "哇！！亮晶晶的ㄝ"
然後到處拿給別人看，別人(若是新手)反應通常是"哇！這是螢光筆墨水嗎"
而且，沒有人發牢騷阿~~~~^^
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※ 編輯: aggaci 來自: 140.114.100.165 (03/25 19:03)
推
03/25 19:36, , 1F
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