Re: [方法] 請問strategene的mutagenesis kit幾個問題
看板Biotech作者fungihsu (Work hard/Play hard)時間19年前 (2007/03/08 08:12)推噓2(2推 0噓 0→)留言2則, 2人參與討論串2/2 (看更多)
※ 引述《ameilover (思考該走的方向)》之銘言：
: 最近要做mutagenesis了
: 但是看他裡面附的protocol有些問題
: 1. 關於Dpn1: protocol說要把Dpn1從mineral oil底下吸起來(我看完的理解是這樣)
: 要用"pointed pipet tip" 請問那個東西一定要用嗎？ 可以跟誰買呢
Mineral oil是早期的PCR機器沒有加熱蓋的時候，為了避免液體蒸發才需要用的。
現在的PCR反應應該都不需要加了。
: 2. NZ amine:我找了很多間公司，還沒看到一個完全符合名字的產品
: 有很多名字很像的，但是又不曉得到底差在哪裡，哪間公司的好用也不知道
: 請問有哪間公司可以直接買到NZY+ broth？ 拜託大家跟我推薦一家吧
通常這個我就用LB medium。
: 3.tetracycline: protocol說那個competent cell是抗tetracycline的
: 所以就不能選擇有同樣抗藥性的plasimd 是為了避免沒有selection的效果嗎？
如果competent cell本身就有tetracyclin-resistance，用也是tetracyclin-resistance
plasmids做 transformation 的時候，無論cell本身有沒有這個plasmid，都會有抗藥性，
這樣無法區分帶有plasmid的clones。
: 我是實驗室第一個做這個實驗的人
: 附近的實驗室也沒有人在做@@
: 請有經驗的版友們可以跟我分享一下操作上的經驗嗎？
: 謝謝
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