[方法] 請問strategene的mutagenesis kit幾個問題

看板Biotech作者 (思考該走的方向)時間19年前 (2007/03/07 23:50), 編輯推噓3(302)
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最近要做mutagenesis了 但是看他裡面附的protocol有些問題 1. 關於Dpn1: protocol說要把Dpn1從mineral oil底下吸起來(我看完的理解是這樣) 要用"pointed pipet tip" 請問那個東西一定要用嗎? 可以跟誰買呢 2. NZ amine:我找了很多間公司,還沒看到一個完全符合名字的產品 有很多名字很像的,但是又不曉得到底差在哪裡,哪間公司的好用也不知道 請問有哪間公司可以直接買到NZY+ broth? 拜託大家跟我推薦一家吧 3.tetracycline: protocol說那個competent cell是抗tetracycline的 所以就不能選擇有同樣抗藥性的plasimd 是為了避免沒有selection的效果嗎? 我是實驗室第一個做這個實驗的人 附近的實驗室也沒有人在做@@ 請有經驗的版友們可以跟我分享一下操作上的經驗嗎? 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 125.229.40.84

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要把Dpn1加到mineral oil底下的PCR reaction中(而非吸起)
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也可以用其他的competent cell,並非一定要用該kit附的
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我做完整個KIT十次反應連個屁都沒有...差點被殺死...貴耶
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可考慮改用Finnzyme Phusion site-directed kit
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好處是可以先檢驗primer是否能夠有PCR product在做
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文章代碼(AID): #15xjymDD (Biotech)
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