[問題] 抽取RNA相關問題

看板Biotech作者lucidol (台北-淡水)時間17年前 (2007/01/27 02:05)推噓4(4推 0噓 6→)

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各位前被大大您們好之前實驗室都是專門做關於E. coli與yeastDNA以及蛋白質表現方面. 但是突然老師要我做抽取RNA來做PCR 目前面臨問題是.因為實驗室裡學長姊沒做過RNA相關實驗. 老師也不是很清楚.問東問西找資料然後叫我找資料跟他討論討論之後老師他本人解釋很怪很疑惑也很不確定.所以想請問有過RNA的前輩解惑我想問的問題是: 1.實驗室沒專門做RNA的實驗桌及儀器(ex.離心機).老師跟我說用水擦一擦再用70 %ETOH 清理過就可以操作RNA實驗.這樣的做法可行與否? 2.關於Tip,實驗室沒有新的tip盒,只有舊的.老師叫我把他一樣用水跟酒精交互清洗. 就可以插tip去滅菌.贓贓的tip盒用這樣處理方式可以把RNase除去嗎?(實驗室的Tip 是沒有棉花濾膜那一種) 3.關於pipette,老師也是叫我用水跟酒精交互擦拭做初步清潔,但我是想問用很久的 pipette內部空腔不是都贓贓的容易污染?要怎麼清理內部減少RNase污染?用棉花棒清在直接高壓高溫滅菌? 4.操作過程中所使用的藥品,是不是都需要在RNase-Free場所配置?配置藥品所需用到水應該是拿DEPC-ddw吧?老師是跟我說像是phenol/chloroform拿抽DNA的那個來用就可以, 這樣ok嗎?我很質疑他說的這一句 5.老師叫我用bead及acid phenol來做RNA extraction,那bead要怎麼處理去污染阿? 用來裝的eppendorf要怎麼做預處理去除RNase?是直接滅菌?? 6.實驗過程中可能會碰到冰箱跟離心機,我戴手套然後再碰這兩個器材會不會因為其他人沒戴手套就這樣把RNase附著到手套上面進而污染我的東西?(實驗室沒專門用 RNA的冰箱,離心機以及場所) 目前我只想到一些疑問,請各位前輩不令指教謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 220.132.182.103

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ROKEE

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enisx

01/27 09:13, , 2^F

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