[問題] 如何計算RT的效率呢?

看板Biotech作者hychou (布丁)時間19年前 (2006/11/20 11:40)推噓0(0推 0噓 0→)

留言0則, 0人參與討論串1/3 (看更多)

板上的前輩們好, 最近在進行RT-PCR,所用的RT為invitrogen的superscript III RT前我先測了total RNA濃度後,以5ug RNA去RT (reaction vol.=20ul) RT結束,我取1ul cDNA來測濃度, 100x稀釋 OD260=0.299 其濃度計算是否為0.299x40x100=1.196ng/ul 這樣算的話cDNA不就有1.196x20=23.92ng @@(昏) 請問前輩們,究竟哪裡出了問題? 我用random primer來RT,應該不會有影響吧?! 另外,這批RNA的ratio大概都在1.6左右, 這樣是否會影響之後的real time PCR反應? 我最煩惱的是standard curve是否會做不好? 謝謝大家幫忙!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.29.223.6

‣ 返回看板[ Biotech ] BIO

‣ 更多 hychou 的文章

文章代碼(AID): #15OIEqzK (Biotech)