Re: [問題] western blotting 的問題
※ 引述《Dokken (LYncH-MoD)》之銘言:
: 請教版上各位
: 我最近2個禮拜來作western出了點問題
: 就是每次壓完片後 都一片空白 看不到band
: 我用1抗體的濃度是1:1000 而2抗是1:2000
: 整個操作大約是
: transfer 400mA 3.5hrs (gel上的marker看起來是有過去)
: blocking 4'C overnite
: 1' Ab 3hrs -> 2'Ab 1hrs
: 這樣的話 可能出現的問題有那些
: 除了抗體濃度太低之外
: 還有什麼可能的小細節我沒注意而產生這種情形呢
: 請各位指點一下 3Q
你用什麼抗體? 樣品是什麼? 有無positive control?
壓片壓多久?二抗確定用對嗎?
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