[問題] western blotting 的問題
請教版上各位
我最近2個禮拜來作western出了點問題
就是每次壓完片後 都一片空白 看不到band
我用1抗體的濃度是1:1000 而2抗是1:2000
整個操作大約是
transfer 400mA 3.5hrs (gel上的marker看起來是有過去)
blocking 4'C overnite
1' Ab 3hrs -> 2'Ab 1hrs
這樣的話 可能出現的問題有那些
除了抗體濃度太低之外
還有什麼可能的小細節我沒注意而產生這種情形呢
請各位指點一下 3Q
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