Re: [問題] western的抗體用量問題
其實未必有那麼單純
換一個方法舉例
同樣用1uL 抗體 稀釋兩千倍成2mL 或五千倍成 5mL
兩種染出來的結果可能不會有很大差異
(當然也可能確實有很大差異 重點是 很多因素會影響結果)
因為抗體跟抗原的結合力其實滿強的
你可以"想像":
被 western membrane 上的 specific band "抓到"的抗體就不會再掉下來了
因此你不管是 1uL of Ab 稀釋成 2mL 還 5mL
在反應到一個程度以後
不是 "所有能跟抗體 binding 的蛋白質都被 bind 上"
就是 "所有能 bind 特定蛋白質的抗體都 bind 上去了"
結果大約是差不了太多
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另一個比喻
把十顆綠豆大小的鐵珠跟 A.90顆真的綠豆 或 B.490顆真的綠豆 混起來
然後用強力磁鐵去嚕阿嚕的
只要嚕得夠久 磁鐵夠強
不管A組還B組 十顆鐵珠大概都會被吸上去
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莫非定律:
到了期末才會想起期初曾選了一門課卻一直沒去上
補充定律:
拿到成績單才發現上了一學期的課忘了去考期末考
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※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
◆ From: ym71010.ym.edu.tw
推
07/09 15:55, , 1F
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