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討論串[問題] western的抗體用量問題
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#1
[問題] western的抗體用量問題
推噓1(1推 0噓 2→)留言3則，0人參與, 最新作者Bluecold (黑特版比就可版好笑)時間18年前 (2006/07/09 01:05), 編輯資訊
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最近在做western. 在抗體用量上總是覺得怪怪的. 一般來說通常是用1比多少表示抗體的數量. 例如1:10000或是1:5000等等. 但是 假若現在我TBST/or PBST用10ml以及50ml. 一樣都是1:10000的話. 那10ml的那一管就必須加入1ul的antibody. 同理.
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#2
Re: [問題] western的抗體用量問題
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者acridines (N329公用助理)時間18年前 (2006/07/09 01:45), 編輯資訊
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沒錯. 用1:多少來表示. 就是表示那隻抗體在原廠濃度(每隻抗體不見得一樣)之下. 要用多少稀釋倍數. 有的也會以 一張membrane需要用多少濃度來表示. 那這樣的稀釋倍數你就要自己算. 或者可能是實驗室測試出來的習慣. 會一樣. 因為濃度相同. 所以如果想要節省抗體用量. 就縮小體積吧. 如果
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#3
Re: [問題] western的抗體用量問題
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者boblu.時間18年前 (2006/07/09 15:55), 編輯資訊
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其實未必有那麼單純. 換一個方法舉例. 同樣用1uL 抗體 稀釋兩千倍成2mL 或五千倍成 5mL. 兩種染出來的結果可能不會有很大差異. （當然也可能確實有很大差異 重點是 很多因素會影響結果）. 因為抗體跟抗原的結合力其實滿強的. 你可以"想像":. 被 western membrane 上的
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