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作者 osla30 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共133則

限定看板：Biotech

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Re: [求救] WB用的安佳脫脂真的停產了！！！

[ Biotech ]16 留言, 推噓總分: +16

作者: xuyxup192224 - 發表於 2025/01/22 16:59(1年前)

4^F推osla30: 推01/23 19:13

[求救] transfer buffer

[ Biotech ]4 留言, 推噓總分: +1

作者: GanLinBa - 發表於 2021/10/03 16:30(4年前)

1^F推osla30: 藥品有沒有問題阿?配完應該約8.6不用調整,稀釋成1X就8.310/03 16:41

[討論] 點突變如何成功

[ Biotech ]15 留言, 推噓總分: +5

作者: nm768417 - 發表於 2021/09/14 15:18(4年前)

3^F推osla30: gcc是要改成什麼?用backtoback比較容易...09/14 21:04

13^F推osla30: 所以原本究竟是什麼？要改成GCC09/16 00:12

[求救] Transformation失敗

[ Biotech ]86 留言, 推噓總分: +24

作者: AndrewsLiu - 發表於 2021/09/08 00:38(4年前)

38^F推osla30: 用overlapping接法就好，很難失敗09/10 07:38

[求救] 單點突變的mouse genotyping

[ Biotech ]9 留言, 推噓總分: +2

作者: pent - 發表於 2021/08/20 11:10(4年前)

7^F推osla30: Mutagenically separated polymerase chain reaction (M08/24 20:04

8^F→osla30: S-PCR)08/24 20:04

9^F→osla30: 跑膠就能分，只是膠的%數2%以上比較好08/24 20:07

[求救] .22 PVDF 與 >100kda protein

[ Biotech ]28 留言, 推噓總分: +6

作者: steve42125 - 發表於 2021/07/25 14:05(4年前)

21^F推osla30: 調pH不會降低緩衝能力嗎？07/28 19:50

Re: [討論] 念生科就來國衛院

[ Biotech ]16 留言, 推噓總分: +4

作者: bb89233 - 發表於 2021/04/28 20:26(4年前)

5^F→osla30: "搜"了一下，你的專注做研究是指po作業上來要人給答案嗎05/01 00:21

6^F→osla30: ？不過這樣放空腦袋就能完成作業也是不錯啦05/01 00:21

[求救] 點突變primer insert

[ Biotech ]16 留言, 推噓總分: +1

作者: shofu0913 - 發表於 2021/03/27 16:34(4年前)

15^F推osla30: 是BlacktoBack還是QuikChange方式？03/29 08:58

16^F→osla30: 打錯，是BacktoBack03/29 08:58

質體

[ Biotech ]60 留言, 推噓總分: +17

作者: nm768417 - 發表於 2020/08/19 16:25(5年前)

10^F推osla30: site-directed mutagenesis08/20 12:34

14^F推osla30: NEB的SDM很快，而且幾乎不會失敗，另外KLD可以自己配XD08/20 19:09

15^F→osla30: SLIC的話，可google關鍵字"HAC"，五分鐘內搞定08/20 19:14

16^F→osla30: 連T4pol都不想買的話，in vivo assembly，全都讓E.coli幫08/20 19:16

17^F→osla30: 你代工08/20 19:16

18^F→osla30: 關鍵字"AQUA cloning"，不過全E.coli代工的話效率較差就08/20 19:18

19^F→osla30: 是了08/20 19:18

22^F推osla30: gibson的話也有modified版，關鍵字"Hot Fusion"，少了Ta08/20 20:56

23^F→osla30: q ligase，成本省很多08/20 20:56

24^F→osla30: 該篇作者也說false positive降很多，重點是便宜很多XD08/20 20:58

27^F推osla30: HAC那篇也超快，T4p一分鐘，EDTA stop，anneal一分鐘，送08/20 21:39

28^F→osla30: 細菌，交給細菌補gap…XD08/20 21:39

29^F推osla30: insert不多的話，SLIC真的好用XD08/20 21:42

36^F推osla30: 其實你玩過一次seamless cloning就不會想再用RE切黏了，08/21 06:24

37^F→osla30: 很難失敗08/21 06:24

38^F推osla30: 無論Gibson、Infusion、LIC、SLIC、OEC、CPEC、IVA，都是08/21 06:32

39^F→osla30: overlap15~25bp去黏，比起RE短短的切位黏，成功率高太多08/21 06:32

40^F→osla30: 了08/21 06:32

50^F推osla30: 的確，不過有的老教授那種先TA挑數十顆菌，再轉RE挑數十08/21 22:52

51^F→osla30: 顆菌，切O/N，ligationO/N的，那個花費的時間與消耗的其08/21 22:52

52^F→osla30: 他耗材，我是覺得沒便宜到哪裡就是了XD08/21 22:52

[求救] 某個質體一濃縮就沈澱

[ Biotech ]58 留言, 推噓總分: +7

作者: hermitwhite - 發表於 2020/02/03 18:05(6年前)

32^F推osla30: 是用Terrific Broth養嗎？02/24 08:36

54^F推osla30: 要不要用Terrific Broth養看看？應該會長多一些02/29 23:55

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