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作者 nellnell 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共40則
限定看板:Biotech
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4F推: 結果跑出太多資訊 很不方便02/06 16:15
4F→: 我今天才下載的就不能用了orz01/11 22:38
6F推: 看你描述是transfect 48小時後放大到10cm dish, transie12/08 18:56
7F→: nt transfect最佳表現是24-48小時, 中間經過一次繼代,12/08 18:56
8F→: 又放兩三天等他長滿, 效力過了沒表現很正常吧12/08 18:56
5F推: 根據你前兩行的敘述 91%的水+3%的35%H2O2就可以配成3%H211/02 14:35
6F→: O211/02 14:35
7F→: 更正9%的35%H2O211/02 15:55
2F→: 嗯嗯我有看到 但是不懂和NHEJ有什麼關係10/17 20:03
3F→: 應該說 沒有那個plasmid的細胞會被G418殺死 但是剩下有p10/17 20:08
4F→: lasmid的細胞為什麼就和NHEJ有關10/17 20:08
18F→: 後來看一些資訊 似乎是有用限制酶去切plasmid 如果NHEJ10/20 09:04
19F→: 活躍的話會把plasmid重新接上 才不會被G418殺ㄙ10/20 09:04
20F→: 死10/20 09:04
3F→: Stripping也不用很久阿 大概10-15分鐘 再用TBST洗一下就08/29 13:06
4F→: 可以重新上抗體了08/29 13:06
8F→: serum有沒有污染要等新的來了測試才知道 目前手邊沒有08/13 12:37
9F→: 那請問如果更短的時間換complete medium,建議多久呢?08/13 12:39
10F→: 怕太快就換的話DNA還沒進去細胞就被我換掉了08/13 12:39
11F→: HCT116根據經驗 繼代後放3-4天都是可以的08/13 12:41
15F→: 請問t大 你serum free是指哪一個步驟?08/13 12:45
16F→: transfect後換的是complete medium 我應該沒記錯吧QQ08/13 12:46
17F→: 是的 一樣條件 不過是不同次抽的GFP08/13 12:47
19F→: 了解 那我先試試看6小時換complete medium 謝謝~08/13 13:14
9F推: 濃度低的話也可能是菌長不夠 如果不是transformation08/04 01:47
10F→: 有問題 或許是菌加太少08/04 01:47
11F推: 12cc看起來是抽mini? 那菌液加多少?08/04 01:50
21F推: 我覺得搖菌不是問題耶 我5ml LB加5ml 菌一樣搖的起來08/05 01:45
29F推: 抱歉打錯 是5ml LB+5ul的菌QQ08/05 07:41
2F推: transfect 不知道算不算07/29 11:52
10F推: 那是loading control吧 不管是要看什麼 只要是western就07/25 19:12
11F→: 會附上 常用的有GAPDH actin tubulin等等07/25 19:12