作者查詢 / migu0531

總覽項目：發文 | 留言 | 暱稱

作者 migu0531 的總覽 (PTT發文,留言,暱稱)

發文數量: 3

收到的『推』: 33 (19.9%)

收到的『→』: 133 (80.1%)

收到的『噓』: 0 (0.0%)

留言數量: 41

送出的『推』: 2 (4.9%)

送出的『→』: 39 (95.1%)

送出的『噓』: 0 (0.0%)

使用過的暱稱: 1

migu0531 在 PTT 最新的發文, 共 3 篇

[求救] 蛋白定量（已更新內容）

[ Biotech ]119 留言, 推噓總分: +21

作者: migu0531 - 發表於 2018/01/26 23:46(8年前)

[求救] 融合細胞

[ Biotech ]4 留言, 推噓總分: 0

作者: migu0531 - 發表於 2018/01/15 10:54(8年前)

[求救] 蛋白純化解凍後出現沉澱

[ Biotech ]43 留言, 推噓總分: +12

作者: migu0531 - 發表於 2017/05/01 22:14(8年前)

migu0531 在 PTT 最新的留言, 共 41 則

[求救] 蛋白定量（已更新內容）

[ Biotech ]119 留言, 推噓總分: +21

作者: migu0531 - 發表於 2018/01/26 23:46(8年前)

6^F→migu0531: 那elisa定量可以用我想的這方式進行嗎？有沒有需要調整01/27 10:59

7^F→migu0531: 的?01/27 10:59

8^F→migu0531: Western wash的時間我也有拉長，但如果是transfer的問題01/27 11:01

9^F→migu0531: 話，會是什麼? 我都用i-blot快速轉漬。但如果做其他純01/27 11:01

10^F→migu0531: 化的蛋白就不會有這樣一圈一圈的現象01/27 11:01

32^F→migu0531: 我不是用壓片的方式~01/27 23:24

33^F→migu0531: 背景有兩的問題，一個是出現一圈或是一坨的，另一個是01/27 23:26

34^F→migu0531: 整張membrane背景容易黑掉01/27 23:26

35^F→migu0531: https://i.imgur.com/aTedfwb.jpg01/27 23:29

36^F→migu0531: 會像這圖一樣，連我的marker，和目標條帶都快跟北京融01/27 23:30

37^F→migu0531: 為一體了！01/27 23:30

38^F→migu0531: 背景01/27 23:30

72^F→migu0531: J大說的用glycine沖提是什麼意思?01/30 20:58

81^F→migu0531: 希望這討論別引起戰爭。我相信血清對上沒有純化的蛋白01/31 12:27

82^F→migu0531: ，背景會髒這件事，以前老師是這樣跟我們說。但現在實01/31 12:27

83^F→migu0531: 驗室認為是我操作的問題，所以上來尋求其他方式01/31 12:27

98^F→migu0531: 是用手機照相的01/31 19:22

99^F→migu0531: 另外，只有在做這全蛋白的western才會有這樣的現象。其01/31 19:59

100^F→migu0531: 他純化的蛋白用市售的抗體則不會這樣01/31 19:59

[求救] 融合細胞

[ Biotech ]4 留言, 推噓總分: 0

作者: migu0531 - 發表於 2018/01/15 10:54(8年前)

4^F→migu0531: 有喔～已經用過HAT，再做eliss挑陽性孔01/22 21:51

[求救] Rabbit anti-Sheep IgG (H+L) Secondary

[ Biotech ]6 留言, 推噓總分: +2

作者: tennisgirl - 發表於 2017/05/04 00:42(8年前)

3^F推migu0531: IHC大部分是用50-200倍稀釋比較多。做法跟western一樣，05/04 12:22

4^F→migu0531: 一抗洗完加二抗，再用DAB05/04 12:22

[求救] 蛋白純化解凍後出現沉澱

[ Biotech ]43 留言, 推噓總分: +12

作者: migu0531 - 發表於 2017/05/01 22:14(8年前)

2^F→migu0531: 前一個elution buffer是用20mM sodium phosphate, 0.5M05/01 22:31

3^F→migu0531: NaCl, 500mM imidazole,pH 7.4 ，也是會沉澱05/01 22:31

5^F→migu0531: 沉澱物用PBS溶不了……我的蛋白啊啊05/01 22:37

9^F→migu0531: 蛋白不建議冷凍我就不清楚了！只知道不建議反覆凍溶。05/01 23:09

10^F→migu0531: 蛋白真是條不歸路……05/01 23:09

16^F→migu0531: Flash freezing?應該沒有……蛋白就直接從4度丟到-20，05/02 07:17

17^F→migu0531: 什麼也沒做也沒加東西05/02 07:17

18^F→migu0531: 想問問大家，都用什麼方法置換buffer? 目前我有用過amic05/02 07:21

19^F→migu0531: on離心加buffer順便濃縮。還有AKTA的desalting column，05/02 07:21

20^F→migu0531: 但蛋白就被大量稀釋，連western都認不到，根本不知道再05/02 07:21

21^F→migu0531: 哪個fraction出來……05/02 07:21

25^F→migu0531: 有一個很小很小的peak，但跑膠跟western一片空白05/02 08:24

36^F→migu0531: 接別人的蛋白，但留下的資料不多，只知道之前的人是用ak05/02 20:30

37^F→migu0531: ta pure純化，我也照做，但還是沉澱。05/02 20:30

38^F→migu0531: 另外很奇怪的事,我有配一瓶10倍的binding buffer 放4度05/02 20:38

39^F→migu0531: 幾天就出現片狀的結晶沉澱…… 不知道使用的二次水有無05/02 20:38

40^F→migu0531: 問題?05/02 20:38

[求救] 請問蛋白質定量Bio-Rad試劑過期還可用嗎?

[ Biotech ]12 留言, 推噓總分: +1

作者: chunz - 發表於 2017/04/23 18:26(8年前)

11^F推migu0531: 沒沉澱應該可以用，目前我也用過期的，拉標準曲線也還ok05/01 22:21

12^F→migu0531: ~05/01 22:21

migu0531 在 PTT 的暱稱紀錄, 共 1 個

暱稱：migu0531

文章數量：3