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作者 FireHell 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共136則

限定看板：Biotech

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Re: [求救] MTT assay 處理組數值高於控制組

[ Biotech ]3 留言, 推噓總分: 0

作者: FireHell - 發表於 2012/01/01 21:56(14年前)

1^F→FireHell:再附上實驗paper: http://0rz.tw/6Ajua01/01 22:36

Re: [求救] MTT assay 處理組數值高於控制組

[ Biotech ]40 留言, 推噓總分: +5

作者: FireHell - 發表於 2011/12/29 21:11(14年前)

5^F→FireHell:跟樓上有過一樣的疑問，這篇很多地方說的不清楚　　　　12/29 22:38

6^F→FireHell:所以我就自己去試了，有洗兩次比都沒洗的吸光值下降了0.412/29 22:40

7^F→FireHell:原因的部份我也是對作者的推論存疑12/29 22:46

10^F→FireHell:樓上您看的跟我看的是同一篇嗎？ orz12/29 23:01

25^F→FireHell:回樓上原原PO，OD值高是因為您種的濃，如果真的有wash必12/30 13:15

26^F→FireHell:要，您又考量SDH遭受菌或藥物影響，可以考慮改用PI stain12/30 13:16

27^F→FireHell:作為您測存活率的方法12/30 13:16

28^F→FireHell:MTT assay作為viability確實有其前提，像飢餓(serum free12/30 13:28

29^F→FireHell:的環境下就可能會因autophagy降低SDH的量，值得注意12/30 13:29

30^F→FireHell:又比如說在complete medium環境下以autophagy inhibitor12/30 15:46

31^F→FireHell:(3-MA, CQ) treat細胞，會得到>100%的結果12/30 15:47

[求救] MTT assay 處理組數值高於控制組

[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: +5

作者: unwell - 發表於 2011/12/29 17:15(14年前)

3^F推FireHell:加入MTT之前不可以用PBS wash，會把酵素洗掉12/29 17:47

4^F→FireHell:很多人會犯這個錯誤12/29 17:47

Fw: [求救] 請問DMSO怎麼脫水

[ Biotech ]12 留言, 推噓總分: +3

作者: FireHell - 發表於 2011/12/19 17:46(14年前)

2^F→FireHell:請問是加了之後大概要泡多久呢？是之後再過濾掉嗎？謝謝12/20 00:12

6^F→FireHell:OK我試試看，感激不盡:)12/20 13:42

12^F→FireHell:哈哈原來是分子篩啊，我就想說怎麼不用過濾@@12/21 18:01

[求救] 分子篩可以重複利用嗎

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +3

作者: ufogirl - 發表於 2011/12/16 16:11(14年前)

8^F推FireHell:可以，100度C以上烘箱即可12/17 18:13

[求救] 一個 100 mm 的 dish 可以養多少細胞呢？

[ Biotech ]27 留言, 推噓總分: +5

作者: Tendin1015 - 發表於 2011/12/09 01:13(14年前)

1^F推FireHell:不要養到全滿就好，體積大概5000~20000cells/mL去換算12/09 01:58

2^F→FireHell:實驗前後細胞密度要一致12/09 01:59

3^F→FireHell:以10 cm dish而言，通常加10~12 mL medium12/09 01:59

4^F→FireHell:lysis buffer的部份要看廠商提供的protocol12/09 02:01

5^F→FireHell:一般而言，細胞越大，密度越低；細胞越小，密度越大12/09 02:02

17^F推FireHell:抱歉我最前面打錯了，要加一個0。50000~200000 cells/mL12/09 15:14

18^F→FireHell:我的sample也超貴(1 mg => 10k)，但是你還是要統一細胞密12/09 15:15

19^F→FireHell:度，我指的是你應該跟前面的任何實驗統一密度12/09 15:18

20^F→FireHell:因此你medium少細胞也會少，western需要不少的細胞來提供12/09 15:19

21^F→FireHell:足夠的蛋白，以我的Hep 3B為例，我濃度是50000 cells/mL12/09 15:20

22^F→FireHell:1盤10 mL，CONTROL都一次重三盤全收，大概可以壓十次12/09 15:20

23^F→FireHell:每次是50 ug12/09 15:21

[討論] 請問大家血球計數，相差多少會重數?

[ Biotech ]3 留言, 推噓總分: +2

作者: TW185930 - 發表於 2011/11/28 22:30(14年前)

2^F推FireHell:在統計上這樣是沒意義的吧？11/29 01:54

[求救] ELISA reader推薦

[ Biotech ]5 留言, 推噓總分: +2

作者: enicole - 發表於 2011/11/22 12:07(14年前)

3^F推FireHell:竟然有吸氣泡的！這也太實用了吧11/23 18:48

[求救] 如何維持medium的pH值？

[ Biotech ]10 留言, 推噓總分: +3

作者: FireHell - 發表於 2011/11/12 21:08(14年前)

5^F→FireHell:請問樓上HEPES和NaHC03的濃度分別是？感謝回答 :)11/13 14:45

Re: [求救] sample抑癌效果突然下降

[ Biotech ]8 留言, 推噓總分: +1

作者: FireHell - 發表於 2011/11/06 19:40(14年前)

2^F→FireHell:基本上不可能，因為我的sample難溶，我都配10 mM是極限了11/06 19:50

3^F→FireHell:如果配更濃的話一定不會完全溶解11/06 19:51

4^F→FireHell:附帶一提，我treat時的DMSO濃度都控制在0.3%11/06 19:51

7^F→FireHell:請問樓上指的是細胞密度太高嗎？我是5000 cells/well11/07 13:33

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