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作者 dovuwa 在 PTT [ Biotech ] 看板的留言(推文), 共20則

限定看板：Biotech

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[ Biotech ]17 留言, 推噓總分: +4

作者: McRay - 發表於 2011/02/27 18:57(15年前)

1^F→dovuwa:謝謝你回應我~destain剛配不久且其他人也用同一罐destain02/27 19:23

2^F→dovuwa:應該是不會有問題我用了不同時期做的同一個clone02/27 19:24

3^F→dovuwa:做出的蛋白做過positive control但是連positive control都02/27 19:25

4^F→dovuwa:不見了~所以我才覺得很困擾02/27 19:26

5^F→dovuwa:請問上下膠緩衝液酸鹼值會影響他完全都空白(樣品)的結果嗎02/27 19:28

[ Biotech ]27 留言, 推噓總分: +4

作者: dovuwa - 發表於 2011/02/27 16:39(15年前)

3^F→dovuwa:整條都沒有東西連pellet 都沒有真的很奇怪~02/27 20:59

4^F→dovuwa:我也有做positive control但是連positive control也是這樣02/27 21:01

11^F→dovuwa:PO 圖喔要怎麼PO?03/01 15:50

12^F→dovuwa:我沒有定量耶因為我只是想看有沒有我想要的東西在裡面03/01 15:51

13^F→dovuwa:我養了15 ml的terrific broth~我都load 10ul跑膠03/01 15:52

14^F→dovuwa:dye應該沒問題因為實驗室裡有另一個學弟也都用同一罐dye03/01 15:53

15^F→dovuwa:應該也沒問題才對太多沒煮開會有很大影響嗎?03/01 15:54

16^F→dovuwa:competent cell我是用rosetta03/01 15:58

17^F→dovuwa:lysis cell後就加sample buffer(final 1X) boil92度C 20分03/01 16:04

18^F→dovuwa:然後mix well就load 膠啦03/01 16:05

23^F→dovuwa:結果我又重新做一次養細胞的方式用terrific broth warm03/06 17:28

24^F→dovuwa:up 在進行induction 我用了原本的lysis cell的protocol和03/06 17:29

25^F→dovuwa:另一種最初的protocol denature也減短至10min03/06 17:30

26^F→dovuwa:load 20ulrun SDS PAGE發現這次跑出來就每個lane都有東西03/06 17:32

27^F→dovuwa:所以之前pellet會完全空白是因為denature太過嚴重嗎03/06 17:33

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