Re: [問題] 普植實漁生報告
革蘭氏染色法(Gram stain)
鑑別染色需用經熱固定之抹片,且連續使用三種化學藥劑。最初試劑是所謂初染劑,其目
的使細菌著色。為形成顏色對比,第二試劑為脫色劑。依細胞化學組成之不同,脫色劑可
完全除去初染或僅除去部份細胞構造之顏色。最後試劑是謂複染劑,與初染呈對比顏色。
脫色時若初染未洗去,則複染不能吸收,細胞與其組成將保留初染顏色。若初染脫色,則
細胞組成即吸收複染之對比顏色。因此細胞之形成或其構造,可依保留之染色劑而鑑別之
。用於細菌學上最重要之鑑別染色法是謂革蘭氏染色。此法乃微生物分類與鑑別之主要工
具,可將細菌區分為兩大組,即革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌。本法使用四種不同試劑,
茲將其作用機轉分別簡述如下:
初染劑:初染劑乃結晶紫,使細菌染成紫藍色。
媒染劑:乃革蘭氏碘液,可與初染劑結合而形成不溶性複合物。所形成之
結晶紫-碘(CV-I)複合體藉以加強染料顏色,此時所有細菌均成紫黑
色。
脫色劑(Decoloring agent):乃95%乙醇,此試劑具有脂溶性
(lipid solvent)與蛋白質脫水劑之雙重功能。其作用依微生物細胞壁
所含脂肪濃度而定。格蘭氏陽性菌之脂質含量低且細胞壁具有厚層之汰
聚醣,乃保留CV-I複合體之主要因素,因少量之脂質經乙醇作用,立刻
溶解,形成細胞壁之細孔,但此細孔隨即因乙醇之脫水作用而封閉,以致
緊密結合之初染劑不易移去,終於保留紫色。革蘭氏陰性菌細胞壁中之外
層含高量之脂質,易為乙醇溶解,形成大孔。即使引起細胞壁蛋白之脫水
也不易封閉該孔,因此有利於未結合CV-I複合體之釋出,致使菌體成無色。
複染劑:最後試劑為番紅,凡經上述脫色之細菌,被此染料染成紅色。因僅革蘭
氏陰性菌發生脫色,故於此步驟能吸收複染劑。革蘭氏陽性菌則保留初
染時之紫色。
上面已經有答案...
再提供一個...
用革蘭氏染色法染色細菌細胞壁,並用酒精脫色。若能將紫色脫去而呈紅色者稱革蘭氏陰
性菌;若呈紫色,則為革蘭氏陽性菌。此法可將所有的細菌分為這兩類,這與細胞壁成分
有關。
革蘭氏陽性菌的壁厚達15-35nm,組成成分中的胞壁酸、磷壁酸和二氨基庚二酸則為陽性
菌特有。革蘭氏陰性菌的壁較薄(10-15nm),成份比陽性菌複雜。不含磷壁酸,但含有
脂蛋白、脂多糖和球蛋白等。
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嗯嗯 請斟酌服用
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