我又來問問題囉

看板CSMU-LS89作者 (帥哥皮 好人骨)時間19年前 (2006/04/18 18:47), 編輯推噓4(403)
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嗯嗯,想問個Southern blot的問題 ^^" 就是在paper上他是要看同一個基因的甲基化情形 他先用甲基化敏感的酵素SmaI去切genomic DNA overnight後再用PstI再切一次再overnight 然後用agarose gel跑電泳再transfer到Hybond N+ membrane 用random primed method用[阿法三十二P ]dCTP-labelled fragment去黏 再用一些我看不懂的鬼overnight以後用機器去看band 重點來了 他說Probes were made by PCR. 然後附了幾組primer 嗯嗯嗯 我的問題是 「Southern blot的probe是用PCR作的喔?」@@? 我以為Southern blot要作PCR是因為一開始的DNA量不夠耶 Orz 以上,謝謝大家 QQ -- 正妹對男生的三種反應 好人 帥哥 宅男 嗯嗯 好無聊喔 (離線) 我去洗澡囉 ^^ 我去打扮一下待會見 ^^ (離線) 明天可以請你幫我修電腦嗎^^ 明天我爸媽不在家 ^^ (離線) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.161.237

04/19 00:33, , 1F
probe可以用pcr去p,或是RE去切plasmid的方式來做...
04/19 00:33, 1F

04/19 00:34, , 2F
但是這跟你說的southern要做PCR是兩件事...了嗎?
04/19 00:34, 2F

04/19 10:38, , 3F
你的意思是還是有需要PCR放大DNA量的步驟嗎?@@?
04/19 10:38, 3F

04/19 11:30, , 4F
兩件事情 做probe 是第一件事情
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04/19 11:31, , 5F
transfer 的DNA 是另外一組 最後兩組加起來
04/19 11:31, 5F

04/19 13:20, , 6F
三樓的你得到他了...不過PCR放大DNA量是訊號太弱時才做...
04/19 13:20, 6F

04/19 13:21, , 7F
非必要....
04/19 13:21, 7F
文章代碼(AID): #14HCFGbu (CSMU-LS89)
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