有關western blot結果之疑問.....

看板CSMU-LS89作者 (想有一個新開始)時間18年前 (2005/09/14 01:45), 編輯推噓10(10推 0噓 11→)
留言21則, 7人參與, 最新討論串1/3 (看更多)
我同學做完western blot 壓片的結果卻是反白的(即是band是白的 backgroud是黑的) 這是哪裡有問題呢???? 我們推測的懷疑點~~ 1.transfer過頭(我們transfer 1小時) 2.blocking過頭(4度c overnight) 3.抗體的問題 還有什麼情況會造成壓片結果會反白的???? 麻煩大家集思廣益 幫忙解決囉~~ 我同學都快哭了....U_U" 感激不盡........ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.177.78
推
203.204.161.176 09/14, , 1F
壓IP板還是底片?...是IP板的話可能是機器沒設定好
203.204.161.176 09/14, 1F
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203.204.161.176 09/14, , 2F
1.的話不會有band 2.3.也不可能
203.204.161.176 09/14, 2F
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140.120.232.8 09/14, , 3F
有可能是抗體污染吧!所以亂認蛋白..推小羚羊的說法
140.120.232.8 09/14, 3F
推
163.15.177.235 09/14, , 4F
壓片是用底片..而且抗體是全新的
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163.15.177.235 09/14, , 5F
而且她一共做了2次...1次band全反白..另1次
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163.15.177.235 09/14, , 6F
則有黑的band跟反白的band
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推
140.120.130.14 09/14, , 7F
他有沒有check底片是正片還是負片...
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推
163.15.161.234 09/14, , 8F
插個話，曉慧我要學測OD值啦 ><"
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還要借ammonium acetate ><"
163.15.161.234 09/14, 9F
推
140.120.130.226 09/14, , 10F
我猜因為訊號太強(蛋白量太多所致)試著縮短壓片時
140.120.130.226 09/14, 10F
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140.116.253.121 09/14, , 11F
我覺得是二抗太強..需要再稀釋...
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推
163.15.177.78 09/14, , 12F
to建毅..蔡小君正在為western苦惱..她說懶ꨠ
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163.15.177.78 09/14, , 13F
得教只要作PCR就能畢業的傢伙 = ="
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163.15.177.78 09/14, , 14F
to大家...感謝大家的熱情回應^^" 代替我同
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163.15.177.78 09/14, , 15F
同學說謝謝囉~~~
163.15.177.78 09/14, 15F
推
140.116.48.86 09/14, , 16F
做PCR就能畢業 這麼爽......XD
140.116.48.86 09/14, 16F
推
163.15.161.234 09/14, , 17F
= =" 那我可以先借ammonium acetate自己try嗎
163.15.161.234 09/14, 17F
→
163.15.161.234 09/14, , 18F
= =" 爽個叼，閒的很空虛啊..
163.15.161.234 09/14, 18F
推
140.116.145.180 09/14, , 19F
能畢業才是王道.......
140.116.145.180 09/14, 19F
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218.169.220.56 09/15, , 20F
畢業後什麼鬼都不會，畢業的很空虛 ＠＠
218.169.220.56 09/15, 20F
推
09/20 23:04, , 21F
其實PCR是很深奧的...恩
09/20 23:04, 21F
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文章代碼(AID): #139n0gCE (CSMU-LS89)
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