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討論串[求救] 如何 PCR full-length cDNA?
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Re: [求救] 如何 PCR full-length cDNA?
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者xxtomnyxx (翼天)時間13年前 (2013/02/22 17:28), 編輯資訊
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我不知道你使用的是哪一種 polymerase，. 但是有些 polymerase 對於長片段的 DNA 效果很差。. 如果你的 cDNA 是完好沒有問題的，. 而且 primer 是正確的且不考慮 polymerase 的問題，. 那還有一種可能，. 就是你要 PCR 的序列屬於 GC-rich，
(還有213個字)
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[求救] 如何 PCR full-length cDNA?
推噓2(2推 0噓 10→)留言12則，0人參與, 最新作者jjcs1001 (以平凡創造奇蹟！)時間13年前 (2013/02/21 17:08), 編輯資訊
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嘗試了很多次. 但全長始終P不出來(3045 bps). 奇妙的是，之前再做其他實驗有P出這個gene的3'端fragment(768 bps). 但現在老師要求保險起見，想要看全長蛋白的表現. 但是我始終P不出來，有可能是template cDNA已經斷光了嗎?. 還是我的primer設計有問題呢
(還有144個字)
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